- enzim egzokrinog pankreasa koji učesvuje u varenju proteina. Izlučuje se u neaktivnom obliku, kao himotripsinogen i aktivira se tek kada dospe u tanko crevo. Himotripsinogen je takozvani zimogeni enzim. Prvo se pomoću crevne enterokinaze aktivira početna, mala količina himotripsinogena pa zatim on aktivira preostalu količinu himotripsinogena.

Spada u klasu endopeptidaza (proteaza koje hidrolizuju peptidne veze u polipeptidnom lancu).

Himotripsin hidrolizuje peptidne veze formirane između karboksilnih grupa aromatičnih aminokiselina (fenilalanin, tirozin, triptofan). Pošto tripsin i himotripsin hidrolizuju različite peptidne veze, delovi nastalih fragmenata će se preklapati, tako da je moguće rekonstruisati aminokiselinsku sekvencu. Moguće je koristiti i druge enzime: klostripain (hidrolizuje Arg rezidue), endopeptidaza Lys-C (hidrolizuje Lys rezidue), stafilokokna proteaza (hidrolizuje Asp i Glu rezidue).